• 産品品牌： REAGEN
• 産品貨号： RN090FP
• 産品規格： 50/100T
• 産品适用： 本試劑盒适用于結核感染的定性檢測，檢測結果可用于結核分枝杆菌感染的輔助診斷。
• 産地來源： 深圳
• 保質期： 12個月

【産品名稱】

通用名稱：結核分枝杆菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

【包裝規格】

100人份/盒

【預期用途】

本試劑盒适用于檢測痰液樣本中的結核分枝杆菌（TB）DNA，可用于結核感染的定性檢測，檢測結果可用于結核分枝杆菌感染的輔助診斷。

【檢驗原理】

本試劑盒采用聚合酶鍊式反應（PCR）結合Taqman技術，對結核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）的特異性DNA核酸片段進行熒光PCR檢測。

【主要成分】

【儲存條件及有效期】

試劑置于-30~-15℃避光保存，有效期為12個月。本産品反複凍融應不超過5次。

【适用儀器】

熒光定量PCR儀：ABI 7500熒光PCR儀.；ABI Quantstudio5 ；Gentier 96R；SLAN-96P全自動醫用PCR分析系統。

【樣本要求】

1.适用樣本類型：痰液

2.樣本采集

以清晨第一口痰為宜，先用清水漱口，囑咐患者用力咳出深部的痰于無菌保存管，密封，即可送檢。

3.樣本保存與運送：

上述采集的樣本可立即用于檢測，或2-8℃保存（不超過24小時），長期保存請置于-20℃。标本運送用冰壺加冰或泡沫箱加冰密封進行運輸。

 【檢驗方法】

1. 樣本處理

取待測樣本200ul，按照核酸提取試劑盒說明書進行核酸提取。

2. 試劑配置（在準備區進行，與擴增區分開，冰上操作）

注：試劑使用前要完全解凍，使用前渦旋混勻，10000 rpm離心5 s，确保試劑完全離心至管底，否則會出現裝量差異的現象。若有N個待檢測樣本，則需配置N+2擴增反應（待檢樣本數N+1個陽性質控品+1個陰性質控品），按下表要求進行擴增反應液的配制，配制完成後充分震蕩混勻，10000 rpm離心5 s。按每管20 μl分裝至0.2 ml PCR管中，并做好标記，擴增反應液需現配現用。

3. 加樣（在樣品處理區進行，冰上操作）

按陰性質控品、待測樣品、陽性質控品的加樣順序，分别取5μL，加入至已分裝擴增反應液的八聯管中，反應總體系為25μL。蓋緊管蓋，短暫離心後置于熒光定量PCR儀中，并記錄樣本擺放順序。

4. 擴增反應（在擴增區進行）

選擇FAM通道檢測結核分枝杆菌核酸，選擇CY5通道檢測内标。按以下擴增程序表設置PCR擴增參數。

 5.質量控制

以上要求需在同一次實驗中同時滿足，否則，本次實驗無效，需重新進行。

6.結果判讀

反應結束自動保存結果，根據分析後圖像調節Baseline 的Start 值、End 值以及Threshold 值（可以根據實際情況自行調整，Start 值可以在3~15、End 值可設在5~20，調整陰性對照的擴增曲線平直或低于阈值線），點擊Analysis 自動獲得分析結果，在Report 界面觀看結果。

試驗結果判斷

【檢驗結果的解釋】

1．實驗室環境污染，試劑污染，樣品交叉污染會出現假陽性結果，如陰性對照檢測為陽性，則需做進一步實驗來确認是哪類污染。如為試劑污染，需開封新的試劑盒再次進行實驗；如為樣品交叉污染，應重複實驗；如為實驗室環境污染，需對實驗室進行徹底清潔或更換實驗室再進行實驗。

2．試劑運輸、保存或配制不當會引起試劑檢測性能下降，出現假陰性結果。如陽性對照檢測為陰性，應開封新的試劑盒再進行實驗。

【檢測方法的局限性】

1. 該試劑盒僅為定性産品，不做定量測定。

2. 該試劑盒的檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應結合其症狀或體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

3. 當樣本的細菌含量低于最低檢出限時，可能會出現假陰性。陰性結果僅說明提取的核酸濃度低于該試劑盒的檢測極限，但不能完全排除細菌感染的可能。

【産品性能指标】

1.準确性：企業陽性參考品檢測結果全部為陽性，陽性率為15/15。

2.最低檢測限：該試劑盒最低檢測限為500copies/mL。

【注意事項】

1．請嚴格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰上操作。

2．試劑配制建議在試劑配制區進行，樣品處理要求在生物安全櫃内操作。臨床實驗室應嚴格按照《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》等有關分子生物學實驗室、臨床基因擴增實驗室的管理規範執行。

3．反應液中的成分對光敏感，應避光保存。反複凍融可能降低試劑盒靈敏度，請按檢測頻次将反應液以适當體積分管保存。

4．反應結束後，擴增管請置于密封袋内丢棄，當日清理，切忌開蓋。

5．不同批号試劑請勿混合使用，請在有效期内使用試劑盒。

6. 本品僅用于體外診斷。